@PHDTHESIS{ 2020:1785030088, title = {An?lise gen?tica e desenvolvimento de um m?todo de diagn?stico, baseado em PCR, para detec??o de Cyniclomyces guttulatus em fezes de c?es}, year = {2020}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/6366", abstract = "O significado das infec??es f?ngicas dos animais tem sido ignorado por muitos veterin?rios. No entanto, problemas recentes causados por doen?as f?ngicas de destaque, por exemplo, a esporotricose de felinos e humanos no Brasil e a criptococose zoon?tica em todo o mundo, demonstraram a necessidade de reverter essa tend?ncia negativa h? muito estabelecida. A levedura ascomic?tica Cyniclomyces guttulatus ? a ?nica esp?cie atualmente inclu?da no g?nero Cyniclomyces. Tradicionalmente, era vista como um componente comensal da microbiota intestinal de coelhos e outros herb?voros. O aumento do interesse em C. guttulatus se desenvolveu com base em relatos da Europa, ?sia, Am?rica do Norte e Brasil, sugerindo que C. guttulatus representava um pat?geno emergente e / ou oportunista de c?es, onde sua presen?a em n?meros elevados estava ligada a sinais cl?nicos, incluindo diarreia, gastroenterite e colangiohepatite. No entanto, pesquisas recentes conduzidas na Holanda e nos Estados Unidos argumentaram que a presen?a dessa levedura em c?es que sofrem de doen?a gastrintestinal ? provavelmente circunstancial e n?o tem relev?ncia cl?nica. O diagn?stico de C. guttulatus em fezes e / ou em material cl?nico ? realizado principalmente usando an?lises microsc?picas e microbiol?gicas baseadas em cultura. Em uma minoria de estudos, a identifica??o definitiva das col?nias da levedura foi feita utilizando a amplifica??o por rea??o em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento de um fragmento do gene 26S rDNA (codifica a subunidade maior do RNA ribossomal). O presente estudo relata o desenvolvimento de m?todos moleculares inovadores para detec??o e caracteriza??o de culturas de leveduras e para a detec??o e caracteriza??o independente de cultura de C. guttulatus diretamente de fezes de c?es. A disponibilidade dos ensaios servir? para reduzir as d?vidas sobre a validade dos diagn?sticos morfol?gicos e pode reduzir o tempo para confirma??o do diagn?stico molecular para at? 48 horas, ao inv?s do prazo atual de 7 a 10 dias. A genotipagem de uma cole??o de isolados de porquinho-da-?ndia (n = 1), coelhos (n = 20) e c?es (n = 8) utilizou amplifica??o por PCR e sequenciamento de fragmentos das sequ?ncias que codificam as subunidades maior (26S) e menor (18S) do RNA ribossomal, as subunidades RPB1 e RPB2 da RNA polimerase II, a citocromo oxidase II e as regi?es espa?adoras internas transcritas (ITS). Alinhamento de sequ?ncias e avalia??o da similaridade entre os nucleot?deos para a maioria das sequ?ncias serviram para apoiar dados de estudos anteriores que sugeriram a poss?vel exist?ncia de duas esp?cies de Cyniclomyces. Curiosamente, o uso da regi?o ITS indicou que pode haver pelo menos tr?s esp?cies de Cyniclomyces. Conclui-se que a identifica??o das novas esp?cies de Cyniclomyces questiona grande parte dos dados produzidos at? o momento em rela??o ? patogenicidade desse organismo. Prev?-se que os resultados deste trabalho sirvam para estimular uma expans?o do estudo do g?nero Cyniclomyces e, como tal, contribuam significativamente para a compreens?o do seu papel na sa?de dos c?es.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }