@MASTERSTHESIS{ 2011:1113418417, title = {Potencial desnitrificador de estirpes de Bradyrhizobium sp. recomendadas para a cultura da soja}, year = {2011}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/3851", abstract = "A fixa??o biol?gica de N2 (FBN) ? fundamental para a nutri??o da cultura de soja, existindo tamb?m ind?cios de que esse processo esteja relacionado ? produ??o de N2O no solo, um g?s com alto potencial de efeito-estufa. O objetivo principal desse trabalho foi avaliar a capacidade de produ??o de N2O por estirpes de Bradyrhizobium spp., recomendadas para a cultura da soja, e observar a presen?a ou aus?ncia dos genes ligados a desnitrifica??o nestas mesmas bact?rias. O estudo foi conduzido em tr?s etapas. Na primeira, a t?cnica de amplifica??o do gene 16S rDNA foi testada para identificar as esp?cies de Bradyrhizobium que seriam utilizadas nos demais ensaios. Na segunda etapa, 12 estirpes de B. japonicum e B.elkanii, crescidas em meio de cultura, foram incubadas em atmosfera livre de O2, contendo ou n?o acetileno, ap?s enriquecimento do meio com nitrato. Avaliou-se a produ??o de N2O por cada estirpe. Nestas estirpes foi verificada a presen?a dos genes ligados a desnitrifica??o (napA, nirK, norC, e nosZ) utilizando rea??es de PCR. Em um segundo estudo, avaliou-se a produ??o de N2O emitido pelo solo durante 63 dias ap?s o plantio de soja em vasos utilizando-se sementes inoculadas, ou n?o, com estirpes de B. japonicum e B. elkanii recomendadas para inoculantes comerciais. As plantas foram colhidas na flora??o, e os n?dulos foram incubados em solu??o com nitrato em atmosfera livre de O2, para avaliar a presen?a de intermedi?rios do processo de desnitrifica??o. Outra parte dos n?dulos colhidos foi incubada em atmosfera livre de O2, contendo concentra??o conhecida de N2O. A t?cnica de PCR utilizando iniciadores para o gene 16S rDNA possibilitou diferenciar as esp?cies B. japonicum e B. elkanii. Al?m disso, pela primeira vez as estirpes SMB1 e DF395 foram identificadas geneticamente como pertencentes ? esp?cie B. elkanii. Em cultura pura as estirpes de B. japonicum produziram mais N2O do que as estirpes de B. elkanii, especialmente na presen?a de acetileno. Entre as 12 estirpes testadas, todas as quatro estirpes de B. japonicum possu?am todos os genes necess?rios para a desnitrifica??o, que permitem a redu??o de nitrato at? N2, exceto a estirpe USDA06 que n?o possu?a o gene nosZ que codifica a enzima N2O-redutase. Para as estirpes de B. elkanii, apenas 29W e SM1b apresentam o gene norC (NO-redutase), sendo o gene nosZ tamb?m presente na estirpe 29W. No ensaio em vasos, as plantas de soja inoculadas com B. japonicum produziram mais N2O do que as plantas inoculadas com B. elkanii. Dos n?dulos dessas plantas, apenas aqueles resultantes da inocula??o com a estirpe CPAC 7 apresentaram consumo de N2O, em todas as repeti??es, quando incubados em atmosfera contendo N2O. N?o houve consist?ncia nos resultados do ensaio com n?dulos em meio com nitrato, pois se observou grande varia??o nas quantidades de nitrato, nitrito e N2O entre as repeti??es, com ind?cios de que em algumas repeti??es parte dos n?dulos poderia estar ocupada com estirpes nativas do solo diferentes das inoculadas. Conclui-se que a capacidade de produzir N2O seja mais comum ?s estirpes de B. japonicum, embora tamb?m ocorra em algumas estirpes de B. elkanii. Em condi??es favor?veis, a emiss?o de N2O do solo plantado com soja deve ser maior em plantas inoculadas com estirpes de B. japonicum.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Fitotecnia}, note = {Instituto de Agronomia} }