@MASTERSTHESIS{ 2013:856011282, title = {Implica??es da utiliza??o de par?metros humanos na detec??o do gene mecA em Staphylococcus spp. isolados de mastite bovina e seus impactos na predi??o da resist?ncia aos beta-lact?micos em ambientes de produ??o leiteira. 2013}, year = {2013}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/3417", abstract = "Staphylococcus aureus apresenta um alto n?vel de resist?ncia antimicrobiana, especialmente aos beta-lact?micos, o que favorece a sua persist?ncia no rebanho. A detec??o do gene mecA ? considerado uma predi??o desta resist?ncia. No entanto, evid?ncias nas pesquisas, revelam que a detec??o do gene mecA n?o desempenha um papel significativo em rela??o a isolados de estafilococos de origem bovina. O presente trabalho foi realizado para investigar a presen?a de um hom?logo, mecALGA251 e para estudar as regi?es conservadas do gene mecA, a fim de desenvolver primers mais espec?ficos. A amostragem compreende 38 S. aureus isolados a partir do leite (bovino), dois Staphylococcus coagulase-negativo (ECN) de m?os e narinas de ordenhadores, e tamb?m dois isolados de S. sciuri e um S. lentus, isolados de cavalos. Uma cepa padr?o ATCC 43300 isolada de humano foi utilizada como controle. A detec??o fenot?pica da resist?ncia ? meticilina foi realizada atrav?s das t?cnicas de ?gar ?screen? com oxacilina e difus?o em disco simples com cefoxitina. Foram realizadas PCRs para detec??o dos genes mecA e mecALGA251. Foi encontrada resist?ncia ? oxacilina em 20 isolados de S. aureus e em cinco ECN nos ensaios fenot?picos, por?m somente nos isolados do ECN, de origem humana e de cavalo, o gene mecA foi detectado. Isolados de bovinos mecA-negativos tamb?m deram negativo para gene mecALGA251. A elabora??o de primers, baseada em sequ?ncias de diferentes regi?es conservadas do gene mecA foi realizada em duas etapas distintas. Na primeira etapa, os primers foram sintetizados com base nas sequ?ncias de nucleot?deos do gene mecA de Staphylococcus spp. (HE681097) de origem humana. S? foi observada a amplifica??o com estes primers em isolados oriundos de ordenhadores e de cavalos, por?m nos isolados de origem bovina, foi encontrado resultado positivo apenas para os primers mecAint1. Com os primers definidos na segunda etapa, baseados na seq??ncia do gene mecA de S. sciuri (AY820253) de origem bovina, foi poss?vel a amplifica??o somente nos isolados provenientes de vacas leiteiras. Atrav?s da compara??o da sequ?ncia do gene mecA, considerando as diferentes origens, bovina, humana e de cavalos, observou-se diferen?as pontuais, por?m, significativas nas sequ?ncias de nucleot?deos da regi?o de anelamento do primer elaborado por Murakami et al. (1991), o que pode levar ? falha de detec??o do gene mecA em isolados de bovinos. Tamb?m foi analisada a presen?a de genes reguladores do sistema mec, n?o sendo poss?vel esta detec??o em isolados de origem bovina. Portanto, mais estudos s?o necess?rios para entender melhor como esse mecanismo funciona para estes isolados.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }