@MASTERSTHESIS{ 2013:656781336, title = {Polimorfismo e express?o do gene da UCP2 no f?gado de cabras em lacta??o}, year = {2013}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/3238", abstract = "As prote?nas desacopladoras de membrana desacoplam a respira??o celular da produ??o de ATP tendo papel importante no metabolismo energ?tico do organismo. Polimorfismos em de genes codificantes para UCPs t?m sido associados a caracter?sticas como cobertura de gordura e ganho de peso em bovinos de corte, e ? obesidade em humanos. A grande mobiliza??o de ?cidos graxos no in?cio da lacta??o pode influenciar na express?o da UCP2 mostrando que esta tem papel nos processos fisiol?gicos desta fase. Com o presente trabalho buscamos verificar se a express?o do gene UCP2 no f?gado de cabras leiteiras varia durante o per?odo inicial da lacta??o e sequenciar uma parte do gene da UCP2 em caprinos verificando a exist?ncia de polimorfismo nesta regi?o. Para isso foram utilizadas 40 cabras (Capra hircus), todas f?meas lactantes, das ra?as Saanen e Alpina das quais primeiramente foram coletados 10 mL de sangue. Posteriormente, para as an?lises de express?o g?nica, 10 desses animais foram abatidos em diferentes est?gios da fase inicial de lacta??o (dia do parto, 7, 21, 35 dias p?s-parto) e uma amostra de tecido hep?tico foi coletada e armazenada em RNA-holder. O sangue total foi utilizado para extra??o de DNA e posterior amplifica??o de 4 fragmentos do gene UCP2 atrav?s da rea??o em cadeia da polimerase, os fragmentos amplificados foram ent?o submetidos ? eletroforese em gel de poliacrilamida a 12% (300V a 24hrs) para avaliar pequenas diferen?as de tamanho entre as amostras. Posteriormente os fragmentos foram avaliados por PCR-RFLP quanto a diferen?as no padr?o de corte da enzima HaeIII. Tr?s diferentes amostras de cada fragmento da regi?o inicial do gene foram selecionadas ao acaso para o sequenciamento de bases. A partir das amostras de tecido hep?tico foi realizada a extra??o de RNA, o qual foi utilizado nas rea??es de PCR em tempo real com o composto fluorescente Syber Green. Para analisar se os gen?tipos encontrados tem influ?ncia sobre produ??o de gordura e procentagem de gordura no leite, foram realizadas an?lises de vari?ncia e estima??o de contrastes. Para avaliar se a express?o variou, nos diferentes dias p?s-parto foi realizada uma an?lise de regress?o. Na regi?o promotora foi encontrado um polimorfismo de tamanho de fragmento que origina dois alelos, o alelo A de tamanho maior e o B, de tamanho menor, estes foram avaliados quanto a sua influ?ncia sobre a porcentagem de gordura no leite e a produ??o de gordura, por?m nenhum dos alelos influenciou estas caracter?sticas. As an?lises de PCR-RFLP mostraram uma diferen?a no padr?o de corte da enzima entre as amostras no ?xon 2 gene dando origem a dois alelos, C e N. Estes tamb?m foram avaliados quanto ? influ?ncia sobre a porcentagem de gordura no leite e produ??o de gordura, por?m nenhuma rela??o foi encontrada. Ap?s o seq?enciamento as sequ?ncias foram comparadas entre si e um polimorfismo de nucleot?deo ?nico foi encontrado no ?ntron 1 por?m nenhuma enzima de restri??o que reconhece este polimorfismo foi encontrada, impossibilitando a genotipagem de um n?mero maior de animais por PCR-RFLP. As rea??es de PCR em tempo real revelaram que express?o da UCP2 no f?gado foi maior no dia do parto e diminuiu gradativamente com o avan?ar da lacta??o at? os 35 dias p?s-parto.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Zootecnia}, note = {Instituto de Zootecnia} }