@PHDTHESIS{ 2014:2111321453, title = {Estudo de diversidade gen?tica e produ??o de enzimas celulol?ticas em bact?rias associadas ao trato digestivo de invertebrados sapr?fagos}, year = {2014}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/2318", abstract = "A simbiose entre invertebrados do solo e microrganismos ? um grande aliado no auxilio da decomposi??o de res?duos vegetais presentes no solo. Os microrganismos por sua vez, apresentam uma imensa diversidade gen?tica e desempenham fun??es cruciais na manuten??o dos ecossistemas, uma dessas fun??es ? a produ??o de enzimas extracelulares que auxiliam na mineraliza??o da mat?ria org?nica. A possibilidade de desenvolver novos processos biotecnol?gicos com base na prospec??o da diversidade microbiana ? imensa, em decorr?ncia da grande variabilidade que existe entre os sistemas biol?gicos e que podem ser aperfei?oados para melhorar os sistemas de produ??o agr?colas de forma sustent?vel. O objetivo deste trabalho foi estudar o perfil da comunidade bacteriana e potencial celulol?tico de bact?rias isoladas de tr?s diferentes esp?cies de invertebrados sapr?fagos. Os experimentos foram montados no Campo Experimental da Embrapa Agrobiologia, Serop?dica, Rio de Janeiro. Gong?los, da esp?cie Trigoniulus corallinus, foram coletados em pilhas de compostos vegetais presentes em torno do campo experiemental, que posteriormente foram incubados durante 60 dias, sob seis diferentes dietas. A diversidade bacteriana do trato intestinal dos invertebrados foi analisada atrav?s da t?cnica de PCR"DGGE por amplifica??o do gene 16S rDNA PCR por eletroforese em gel com gradiente desnaturante (DGGE); foram utilizados dois dom?nios Bacteria e Actinobact?ria. Algumas bandas do gel de DGGE foram extra?das e sequenciadas. Para avaliar o potencial quanto ? produ??o de celulases em resposta ? presen?a de carboxi"metil"celulose (CMC) das bact?rias isoladas, foi utilizada a t?cnica de colora??o vermelho Congo, e os valores foram expressos atrav?s de (Ie) ?ndice enzim?tico. A partir dos maiores valores de (Ie), foram selecionadas vinte e tr?s bact?rias para a an?lise de sequenciamento do gene 16S rDNA. Ap?s a identifica??o filogen?tica, foi avaliado o potencial celulol?tico, atrav?s de testes de atividade celulol?tica de endoglucanases (CMCase) e endo e exoglucanases (FPase). Para determinar a massa molecular e atividade das enzimas foram realizados g?is de poliacrilamida (SDS"PAGE) e zimograma. Os resultados obtidos na t?cnica de DGGE, os perfis de bandas de DGGE mostrou que a microbiota intestinal dos invertebrados, det?m grupos bacterianos distintos. Pode"se inferir neste ponto, que apesar das comunidades possu?rem abund?ncia similar, como as esp?cies de Trigoniulus corallinus e Cubaris murina, os grupos que comp?em esta abund?ncia foram diferentes entre as esp?cies de invertebrados. A partir dos clones de bandas incisadas, foram sequ?nciados membros de tr?s filos, Proteobacteria, Firmicutes e Bacteroidetes. Atrav?s da an?lise filogen?tica, foi poss?vel identificar as 23 esp?cies de bact?rias. Apresentando dois filos distintos Actinomicetos e Firmicutes, o maior g?nero identificado foi Streptomyces, seguido de um isolado para Bacillus, Paenibacillus e Staphylococcus. O trato intestinal das tr?s esp?cies de invertebrados sapr?fagos revelou ser um ambiente h?bil ? prospec??o de bact?rias com efici?ncia celulol?tica, com alto potencial para futuros estudos biotecnol?gico.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncia, Tecnologia e Inova??o em Agropecu?ria}, note = {Pr?-Reitoria de Pesquisa e P?s-Gradua??o} }