@PHDTHESIS{ 2016:1111026277, title = {Express?o g?nica na forma??o do biofilme e resist?ncia aos beta-lact?micos em isolados de Staphylococcus aureus provenientes de leite mast?tico bovino}, year = {2016}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/2065", abstract = "Staphylococcus spp. tem papel importante na etiologia da mastite bovina. Staphylococcus aureus ? considerada a esp?cie mais relevante devido ? produ??o de fatores de virul?ncia, tais como ?slime?, o que favorece a forma??o do biofilme. O presente trabalho teve por objetivo detectar a express?o fenot?pica da forma??o de biofilme em 20 isolados de S. aureus oriundos de mastite bovina, detectar e quantificar a express?o dos genes envolvidos na sua produ??o e regula??o, al?m de detectar a resist?ncia fenogenot?pica aos beta-lact?micos para avalia??o da poss?vel rela??o da produ??o de biofilme com a resist?ncia antimicrobiana. Os isolados foram caracterizados atrav?s de testes fenogenot?picos e MALDI-TOF, submetidos ?s provas fenot?picas de detec??o da forma??o de biofilme e avalia??o da suscetibilidade aos beta-lact?micos. A Concentra??o Inibit?ria M?nima (CIM), Concentra??o Bactericida M?nima (CBM) e a Concentra??o Inibit?ria M?nima no Biofilme (CIMB) foram determinadas para tr?s isolados selecionados com base na varia??o da intensidade da produ??o de biofilme. Posteriormente, todos os isolados foram submetidos ? t?cnica de PCR para detec??o dos genes de produ??o de ?slime? (icaA e icaD), prote?na Bap (bap), beta-lactamase (blaZ) e prote?na ligante de penicilina alterada (mecA). Al?m de detec??o do sistema regulador Agr (agr RNAIII) e da tipifica??o do sistema Agr (agr I, agr II, agr III e agr IV). Foi realizada Microscopia Eletr?nica de Varredura (MEV) para determinar o intervalo de tempo mais adequado para a an?lise do biofilme. A PCR em tempo real (qPCR) foi realizada nos tempos selecionados para quantificar a express?o dos genes icaA, icaD e hld em tr?s isolados com produ??o variada de biofilme. Todos os isolados foram produtores de biofilme e a maioria apresentou os genes icaA e icaD. Apenas um isolado apresentou o gene bap. O gene agr tipo II mostrou preval?ncia de 70%. A MEV mostrou mudan?as graduais no arranjo bacteriano durante a forma??o de biofilme ao longo das fases da curva de crescimento que atingiu seu pico de forma??o na fase estacion?ria. A an?lise transcricional evidenciou maior express?o dos genes ica no tempo de 8 h de crescimento e hld em 24 h. Contudo, a cepa N-365 mostrou baixa produ??o dos genes ica. Para este estudo, a resist?ncia ? penicilina foi relacionada com a produ??o de beta-lactamase, enquanto a elevada CBM detectada para cefoxitina pode estar associada ? prote??o que o biofilme oferece, epis?dio evidenciado pelo fato dos isolados apresentarem valores de CIMB superiores aos CIMs testados para as c?lulas planct?nicas.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }