@MASTERSTHESIS{ 2015:83564116, title = {Isolamento e caracteriza??o de Cyniclomyces guttulatus (Robin) Van Der Walt e Scott (1971) de c?es procedentes da Barra da Tijuca, Rio de Janeiro, RJ}, year = {2015}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/1749", abstract = "A levedura, Cyniclomycesguttulatus ? um ascomiceto e tem sido reconhecida como um componente da microbiota natural de coelhos e outros herb?voros. Mais recentemente, uma poss?vel associa??o entre esta levedura e doen?as gastrintestinais em c?es tem sido relatada por pesquisadores na Europa, EUA, Jap?o e Brasil. O presente estudo combinou m?todos de an?lises morfol?gica e molecular (PCR-RFLP e sequenciamento de nucleot?deos), para examinar culturas de C. guttulatus recuperados de coelhos brasileiros (15 isolados) e c?es (7 isolados), com o objetivo de desenvolvimento de um m?todo para a identifica??o diferencial de C. guttulatus e melhorar o conhecimento existente sobre a biologia desse organismo. O exame microsc?pico e macrosc?pico das col?nias isoladas em combina??o com an?lise do zimograma (testes de fermenta??o de carboidratos), n?o foi capaz de fornecer uma identifica??o definitiva para as culturas suspeitas. As an?lises in silico de polimorfismo de comprimento de fragmentos de restri??o (RFLP) de produtos de PCR virtuais (correspondentes ao dom?nio D1/D2 do gene 26S RNA ribossomal de C.guttulatus e outras esp?cies de levedura conhecidas como associadas a c?es), indicou que a digest?o com a enzimas de restri??o Ddel, HaeIII e MspI permitiria a identifica??o diferencial de C. guttulatus. As an?lises das digest?es in vitro de produtos de PCR confirmaram as previs?es das an?lises in silico e demonstrou que a identifica??o diferencial de C.guttulatus poderia ser feita usando apenas duas enzimas (DdeI e MspI). O sequenciamento dos produtos de PCR do dom?nio D1/D2 demonstraram a presen?a de varia??es substanciais de nucleot?deos nas culturas analisadas e estas foram divididas em tr?s grupos, denominados de sequ?ncias tipos (ST's). Dois destes grupos estavam estreitamente relacionados uns aos outros. O terceiro tipo de sequ?ncia mostrou grande varia??o de nucleot?deos e pode representar uma nova esp?cie ou subesp?cie dentro do g?nero Cyniclomyces", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }