@MASTERSTHESIS{ 2019:1035205073, title = {Avalia??o da popula??o de duas esp?cies diazotr?ficas associativas em tecidos de braqui?ria e milho utilizando PCR quantitativa}, year = {2019}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/5721", abstract = "Bact?rias diazotr?ficas dos g?neros Azospirillum e Herbaspirillum, em associa??o com gram?neas como o milho e forrageiras do g?nero Brachiaria podem promover efeitos ben?ficos ?s plantas, como a fixa??o biol?gica de nitrog?nio (FBN). A t?cnica de PCR quantitativa (qPCR) ? eficiente no monitoramento de popula??es de bact?rias diazotr?ficas inoculadas, por?m sua aplicabilidade em n?vel de estirpe necessita de maiores estudos. Este trabalho teve o objetivo de selecionar oligonucleot?deos (primers) para posterior quantifica??o da popula??o de A. brasilense em tecidos de raiz e colmo de braqui?ria (Brachiaria spp.) e H. seropedicae em raiz de milho (Zea mays) por qPCR. Os primers desenhados foram avaliados quanto a sua especificidade em n?vel de estirpe e esp?cie, por meio de PCR convencional. J? a sensibilidade e efici?ncia dos primers foram determinadas por rea??es de qPCR. A quantifica??o por qPCR estirpeespec?fica de A. brasilense e H. seropedicae associadas a tecidos de braqui?ria e milho foi feita a partir de duas curvas-padr?o diferentes. Os resultados obtidos por PCR quantitativa com os pares de primer selecionados foram comparados a contagem por microgota. A quantifica??o da estirpe A. brasilense Sp245 foi feita a partir do DNA extra?do de tecidos de colmo e raiz de cultivares de braqui?ria inoculada e sem inocula??o, crescidas em condi??es de campo. A popula??o bacteriana das estirpes A. brasilense Sp245 e H. Seropedicae ZAE94 foi quantificada atrav?s do DNA gen?mico de raiz de milho inoculado com cada estirpe-alvo e plantas controle, sem inocula??o, crescidas em condi??es de casa de vegeta??o com substrato est?ril sob duas dosagens de N (3 e 0,3 mM). O par de primer Sp245p10, foi espec?fico para a estirpe Sp245 e os pares de primer ZAEF1R1 e ZAEF2R2 foram espec?ficos para a estirpe ZAE94. A quantifica??o, por qPCR, das estirpes Sp245 e ZAE94 apresentou resultados similares ? contagem por microgota. Em rela??o ao experimento a campo com braqui?ria, o n?mero de c?lulas bacterianas da estirpe Sp245 foi maior em plantas inoculadas das cultivares Basilik e Piat?. No experimento com milho em casa de vegeta??o, a dose de 3 mM de N favoreceu a popula??o end?gena de bact?rias da estirpe Sp245 em plantas do tratamento controle, enquanto que a dose de N n?o interferiu na popula??o das estirpes Sp245 e ZAE94 nas plantas inoculadas", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Fitossanidade e Biotecnologia Aplicada}, note = {Instituto de Ci?ncias Biol?gicas e da Sa?de} }