@MASTERSTHESIS{ 2019:540402803,
 	title = {Avaliação da população de duas espécies diazotróficas associativas em tecidos de braquiária e milho utilizando PCR quantitativa},
 	year = {2019},
 	url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/5721",
 	abstract = "Bactérias diazotróficas dos gêneros Azospirillum e Herbaspirillum, em associação com
 gramíneas como o milho e forrageiras do gênero Brachiaria podem promover efeitos
 benéficos às plantas, como a fixação biológica de nitrogênio (FBN). A técnica de PCR
 quantitativa (qPCR) é eficiente no monitoramento de populações de bactérias
 diazotróficas inoculadas, porém sua aplicabilidade em nível de estirpe necessita de
 maiores estudos. Este trabalho teve o objetivo de selecionar oligonucleotídeos (primers)
 para posterior quantificação da população de A. brasilense em tecidos de raiz e colmo
 de braquiária (Brachiaria spp.) e H. seropedicae em raiz de milho (Zea mays) por
 qPCR. Os primers desenhados foram avaliados quanto a sua especificidade em nível de
 estirpe e espécie, por meio de PCR convencional. Já a sensibilidade e eficiência dos
 primers foram determinadas por reações de qPCR. A quantificação por qPCR estirpeespecífica
 de A. brasilense e H. seropedicae associadas a tecidos de braquiária e milho
 foi feita a partir de duas curvas-padrão diferentes. Os resultados obtidos por PCR
 quantitativa com os pares de primer selecionados foram comparados a contagem por
 microgota. A quantificação da estirpe A. brasilense Sp245 foi feita a partir do DNA
 extraído de tecidos de colmo e raiz de cultivares de braquiária inoculada e sem
 inoculação, crescidas em condições de campo. A população bacteriana das estirpes A.
 brasilense Sp245 e H. Seropedicae ZAE94 foi quantificada através do DNA genômico
 de raiz de milho inoculado com cada estirpe-alvo e plantas controle, sem inoculação,
 crescidas em condições de casa de vegetação com substrato estéril sob duas dosagens de
 N (3 e 0,3 mM). O par de primer Sp245p10, foi específico para a estirpe Sp245 e os
 pares de primer ZAEF1R1 e ZAEF2R2 foram específicos para a estirpe ZAE94. A
 quantificação, por qPCR, das estirpes Sp245 e ZAE94 apresentou resultados similares à
 contagem por microgota. Em relação ao experimento a campo com braquiária, o número
 de células bacterianas da estirpe Sp245 foi maior em plantas inoculadas das cultivares
 Basilik e Piatã. No experimento com milho em casa de vegetação, a dose de 3 mM de N
 favoreceu a população endógena de bactérias da estirpe Sp245 em plantas do tratamento
 controle, enquanto que a dose de N não interferiu na população das estirpes Sp245 e
 ZAE94 nas plantas inoculadas",
 	publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Fitossanidade e Biotecnologia Aplicada},
 	note = {Instituto de Ciências Biológicas e da Saúde}
}