@PHDTHESIS{ 2019:1948913746, title = {Abordagens enzim?ticas e prote?micas da resposta de fungos artropodopatog?nicos submetidos a estresses e na infec??o contra Rhipicephalus microplus}, year = {2019}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/5344", abstract = "Na ?ltima d?cada, estudos envolvendo a aplica??o de Metarhizium spp. e Beauveria bassiana no controle de Rhipicephalus microplus t?m crescido de forma exponencial. O presente estudo avaliou a influ?ncia de repiques sucessivos em meio de cultivo sint?tico (batata-dextrose-?gar - BDA) na atividade enzim?tica e efeitos sobre virul?ncia para R. microplus em tr?s isolados de Metarhizium. Para isso, amostras foram obtidas do cultivo inicial (In?cio) e ap?s o d?cimo (10? ciclo) e vig?simo (20? ciclo) repiques. Apresentando consequ?ncias individualizadas entre os isolados, altera??es na macromorfologia, diminui??o do crescimento radial e produ??o conidial, al?m de redu??o de virul?ncia e atividades de Pr1, Pr2 e lipase foram majoritariamente detectadas ap?s o 20? ciclo. Em outra vertente, foi-se tamb?m estudado o efeito de um agente oxidante (menadiona - MEN), potente indutor de esp?cies reativas de oxig?nio, no desenvolvimento, virul?ncia para R. microplus, atividade enzim?tica e secre??o proteica de M. anisopliae sensu stricto (s.s.). Por ser pouco tolerante, para todos os experimentos, uma subdosagem (50% da CL50) de MEN foi inicialmente adicionada aos cultivos. Em meio s?lido suplementado com MEN, mudan?as relevantes no desenvolvimento das col?nias, al?m de atividades enzim?ticas conidiais foram detectadas. Em contrapartida, de forma surpreendente, melhorias significativas no percentual de mortalidade de larvas tamb?m ocorreram. Nas an?lises de meio basal l?quido acrescido de cut?cula de R. microplus, num total de 654 prote?nas identificadas, 31 foram up- e down-reguladas, estando principalmente relacionadas ? atividade antioxidante (catalase), patogenicidade (como Pr1B, Pr1D e Pr1K), reparo celular e morfog?nese. Por fim, a atividade e secre??o de prote?nas (secretoma) de Beauveria bassiana s.l. durante a infec??o em R. microplus e sua compara??o com condi??es normais de crescimento foram reportadas. A partir de meio basal l?quido acrescido de cut?cula de R. microplus, e aplicando uma tecnologia multidimensional de identifica??o de prote?nas, de um total de 236 prote?nas, 32 prote?nas foram identificadas em ambas as condi??es de estudo e 50 exclusivamente na condi??o de infec??o, sendo estas atribu?das a diferentes aspectos como ades?o ao hospedeiro, penetra??o cuticular, defesa f?ngica e estresse. Nesse contexto, um maior n?mero de prote?nas detectadas com atividade hidrol?tica, classe enzim?tica de todas as enzimas degradadoras de cut?cula, como lipases e proteases, foram identificadas e validadas atrav?s de ensaios enzim?ticos. Em suma, destaca-se que o repiques sucessivos e o estresse oxidativo, assim como o desconhecimento dos principais metab?litos produzidos durante a infec??o por B. bassiana, ainda limitam prospec??es futuras para o biocontrole, em especial ? aplica??o e ao monitoramento de produtos ? base de fungos artropodopatog?nicos no uso para carrapatos.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }