@PHDTHESIS{ 2013:2146316538,
 	title = {Atividade proteol?tica de bact?rias psicrotr?ficas isoladas de leite cru e implica??es nos testes de adi??o fraudulenta de soro de queijo.},
 	year = {2013},
 	url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/3860",
 	abstract = "Fraude em leite por adi??o de soro ? um problema recorrente no Brasil, enquanto a contamina??o e deteriora??o do leite por bact?rias psicrotr?ficas ? um dos principais problemas enfrentados pela ind?stria de latic?nios. Dentre estas bact?rias, o g?nero Pseudomonas tem sido destacado em diversos estudos microbiol?gicos como grupo predominante na microbiota do leite refrigerado. Mais recentemente, esta predomin?ncia tem sido confirmada atrav?s da aplica??o de t?cnicas moleculares de identifica??o microbiana. Ainda, an?lises moleculares t?m servido para levantar quest?es a respeito da precis?o de algumas identifica??es fenot?picas realizadas anteriormente, e em rela??o ao papel de g?neros e esp?cies n?o detectados ou subestimados, e que podem ser encontrados como componentes principais da microbiota do leite refrigerado. Problemas relacionados ? qualidade do leite e derivados devido ? sua multiplica??o e atividade enzim?tica s?o somados ao fato de que as suas proteases podem provocar resultados falso-positivos na detec??o de fraude por adi??o de soro. Esta pr?tica, comum em alguns pa?ses, inclusive o Brasil, ? normalmente detectada atrav?s da an?lise do ?ndice de CMP. Neste estudo, o total de 12 linhagens de bact?rias psicrotr?ficas isoladas de leite e identificadas fenotipicamente em estudo anterior (ARCURI et al., 2008) foram reidentificadas usando m?todos genot?picos baseados na an?lise da sequ?ncia (16S rRNA) que codifica a subunidade menor do DNA ribossomal. Esta t?cnica proporcionou identifica??o em n?vel de esp?cie para quatro linhagens recebidas como Acinetobacter spp. como sendo A. guillouiae (3) e A. johnsonii (1), al?m de identificar como P. rhodesiae uma linhagem recebida como P. fluorescens. Adicionalmente, tr?s linhagens recebidas como P. putida foram reclassificadas como P. psychrophila e uma linhagem fenotipicamente identificada como Aeromonas hydrophila foi identificada como A. punctata. O crescimento dessas bact?rias em temperatura de refrigera??o foi avaliado atrav?s da inocula??o no leite (ca 103 UFC mL-1) e incuba??o em diferentes tempos/temperaturas (refrigera??o), em acordo com delineamento fatorial (22) com tr?s repeti??es no ponto central. Ap?s cada per?odo, a produ??o de CMP foi avaliada por cromatografia l?quida com filtra??o em gel (HPLC-FG) e os resultados de um subgrupo de amostras foram comparados com os obtidos por teste imunocromatogr?fico r?pido e por cromatografia l?quida com ioniza??o em eletrospray acoplada a espectrometria de massas em modo tandem (HPLC-ESI-MS/MS), cuja sensibilidade torna poss?vel identificar resultados falso-positivos. A produ??o de CMP avaliada por HPLC-FG foi maximizada pela condi??o 10?C/4d para todas as linhagens, exceto para acinetobacters. Duas linhagens de P. rhodesiae apresentaram os maiores n?veis, seguido por uma linhagem A. hydrophila (P07). Modelos lineares foram constru?dos para crescimento bacteriano, no entanto, para a produ??o de CMP 66.6% das amostras apresentaram tend?ncia a comportamento quadr?tico. A an?lise por HPLC-ESI-MS/MS mostrou que a percentagem de pseudo CMP na condi??o 10?C/4d foi superior a 50% em
 viii
 rela??o ao CMP verdadeiro em todas as amostras, exceto para a inoculada com A. punctata (P65). Apesar da temperatura (10?C) n?o ser permitida na legisla??o brasileira para armazenamento do leite, os dados demonstram o potencial dessas linhagens em gerar resultados falsos positivos (por HPLC-FG) para a adi??o fraudulenta de soro no leite.",
 	publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncia e Tecnologia de Alimentos},
 	note = {Instituto de Tecnologia}
}