@PHDTHESIS{ 2012:1989095480, title = {Otimiza??o da t?cnica da Nested-PCR e genotipagem de Giardia intestinalis em caprinos de explora??o leiteira}, year = {2012}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/3514", abstract = "A infec??o por Giardia intestinalis assume destaque em caprinos jovens com aptid?o leiteira, pelo fato de ser uma protozoose debilitante, al?m de representar um risco de contamina??o ambiental por formas infectantes, as quais se disseminam facilmente. Este estudo teve como objetivos: (1) estabelecer a ocorr?ncia de Giardia intestinalis em amostras fecais de caprinos, provenientes de duas caprinoculturas (A e B) localizadas no estado do Rio de Janeiro, Brasil, atrav?s do diagn?stico parasitol?gico de fezes; (2) otimizar as melhores condi??es de rea??o da Nested-PCR para detec??o de Giardia sp. utilizando-se os genes alvo ?-giardina, tpi e gdh; e (3) caracterizar o(s) gen?tipo (s) de Giardia intestinalis obtidos de amostras fecais positivas atrav?s de sequenciamento e an?lises gen?ticas, comparando as sequ?ncias obtidas com aquelas depositadas no GenBank. Foram coletadas amostras fecais de todos os animais jovens (at? um ano de idade) (n=58) e de 10% dos animais adultos (n=18). As amostras foram coletadas diretamente do reto e submetidas ? t?cnica de centr?fugo-flutua??o em solu??o saturada de a??car para pesquisa de cistos de Giardia intestinalis por microscopia, com posterior caracteriza??o molecular das amostras positivas. Das 76 amostras analisadas, 17 (22,4%) foram positivas para cistos de Giardia intestinalis, sendo todas provenientes de animais jovens da caprinocultura A. Tamb?m foram coletadas amostras de fezes caninas (n=9) da propriedade A, para avalia??o do papel destes no ciclo de transmiss?o. Tr?s (33,3%) amostras caninas foram positivas para cistos de Giardia. As amostras positivas foram submetidas ?s t?cnicas de PCR-Nested e sequenciamento utilizando-se os genes-alvo ?-giardina, gdh e tpi. A otimiza??o dos m?todos moleculares permitiu uma melhor obten??o de fragmentos de DNA, os quais possibilitaram a genotipagem de 8/17 amostras obtidas. Foi encontrando apenas o gen?tipo E nos isolados, os quais apresentaram heterogeneidade nas sequ?ncias obtidas, com n?meros variados de polimorfismo de nucleot?deo ?nico. O presente estudo foi o primeiro a realizar a caracteriza??o molecular de Giardia intestinalis proveniente de amostras de caprinos no Brasil, contribuindo para tra?ar a epidemiologia molecular deste parasito no pa?s.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }