@PHDTHESIS{ 2013:349600375, title = {Diagn?stico histopatol?gico, imuno-histoqu?mico e molecular da paratuberculose subcl?nica na Regi?o Sul do Estado do Rio de Janeiro. 2013}, year = {2013}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/3461", abstract = "A dificuldade no diagn?stico da paratuberculose na fase assintom?tica est? relacionada principalmente ? resposta imune do hospedeiro frente aos diversos est?gios da enfermidade; a maioria dos animais infectados por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map) n?o apresenta e n?o apresentar? sinais cl?nicos caracter?sticos da enfermidade ao longo de sua vida e pode eliminar, intermitentemente, o agente infeccioso no ambiente, atrav?s das fezes, mantendo a infec??o no rebanho. Atualmente, os testes laboratoriais dispon?veis para diagn?stico subcl?nico da paratuberculose apresentam baixa efici?ncia, o que limita o diagn?stico precoce da enfermidade e contribui para a inefici?ncia das medidas de controle da infec??o no rebanho. O desenvolvimento de t?cnicas confi?veis e espec?ficas para a detec??o ?post-mortem? da paratuberculose possibilita o diagn?stico antes do aparecimento dos sinais cl?nicos, e pode auxiliar na elabora??o de novos testes para detec??o ?in vivo? da infec??o. No Brasil, a paratuberculose j? foi descrita em diversas esp?cies de ruminantes e em v?rios estados, no entanto, n?o h? programas sanit?rios oficiais para o controle da enfermidade. Um dos objetivos deste trabalho foi detectar a infec??o pr?-cl?nica da paratuberculose em bovinos oriundos de rebanho positivo para paratuberculose por metodologias de diagn?stico an?tomopatol?gico. Foram realizados estudos histopatol?gico, histoqu?mico e imuno-histoqu?mico de intestino delgado e linfonodos mesent?ricos coletados no frigor?fico local. ? histopatologia, observaram-se les?es compat?veis com paratuberculose em animais assintom?ticos; bacilos ?lcool-?cido resistentes n?o foram visualizados e a imuno-histoqu?mica mostrou marca??o positiva em alguns fragmentos analisados. A partir dos resultados, podemos afirmar que o teste de imuno-histoqu?mica pode ser uma importante ferramenta para detec??o de Map, especialmente em tecidos com les?es tuberculoide ou ?paucibacillary?, enriquecendo os m?todos convencionais de diagn?stico histopatol?gico para confirma??o da infec??o. Al?m disso, em situa??es onde n?o h? disponibilidade de material para cultivo bacteriano pode-se utilizar desta metodologia para conclus?o do diagn?stico. Na segunda parte do trabalho, foi realizado um estudo comparativo de duas solu??es fixadoras de tecido, uma contendo formol, subst?ncia tradicionalmente utilizada em laborat?rios de patologia e a outra composta por sais de zinco. O intuito do estudo foi avaliar a manuten??o da histomorfologia, a capacidade de detec??o de bacilos ?lcool-?cido resistentes e ant?genos de Mycobacterium spp. por imunohistoqu?mica e amplifica??o dos fragmentos de DNA bovino e de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis por PCR GAPDH, IS900 e F57, em fragmentos de ?leo e linfonodo mesent?rico fixados, de bovino com paratuberculose cl?nica. Avaliaram-se, tamb?m, poss?veis altera??es causadas em diferentes per?odos de tempo em que os fragmentos foram mantidos na solu??o fixadora. Verificou-se not?vel manuten??o da arquitetura do tecido em fragmentos fixados em solu??o de zinco, com qualidade da imagem histol?gica similar aos tecidos fixados em formol; os resultados obtidos pela colora??o de Ziehl-Neelsen e imunohistoqu?mica foram semelhantes nos dois fixadores. J? a PCR mostrou amplifica??o apenas nas amostras fixadas em zinco, o que demonstra que este fixador pode ser uma ferramenta importante para manuten??o de ?cidos nucleicos e macromol?culas para estudos gen?ticos e prote?micos.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }