@MASTERSTHESIS{ 2016:915710353,
 	title = {An?lise prote?mica comparativa em Gluconacetobacter diazotrophicus estirpe PAL5 em resposta a presen?a de per?xido de hidrog?nio e efeitos do estresse na coloniza??o de plantas de arroz},
 	year = {2016},
 	url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/3257",
 	abstract = "O nitrog?nio ? um nutriente absorvido em maiores quantidades pelas plantas e, apesar de ser abundante na atmosfera, encontra-se em uma forma n?o-assimil?vel. Entre as alternativas de entrada de N para os ecossistemas, fixa??o biol?gica de nitrog?nio (FBN) ? considerada como a mais vi?vel, uma vez que reduz os custos e danos ao meio ambiente, diminui a depend?ncia de fertilizantes nitrogenados e contribui para a fertilidade do solo. Este processo ? realizado pela enzima nitrogenase e requer grandes quantidades de ATP fornecidos pela respira??o aer?bica. Durante este processo, as esp?cies reativas de oxig?nio (EROs) podem ser geradas, danificando as c?lulas, inibindo a atividade da nitrogenase e afetando os processos de fotoss?ntese e coloniza??o. Para conseguir realizar a FBN e colonizar plantas, as bact?rias endof?ticas devem resistir de forma eficiente ou reparar os danos causados pelas esp?cies reativas de oxig?nio. Gluconacetobacter diazotrophicus ? uma bact?ria diazotr?fica endof?tica que, quando submetida a estresse oxidativo, expressa prote?nas que eliminam diretamente os oxidantes. Neste estudo, foi analisado o efeito do estresse oxidativo induzido pelo H2O2 no perfil de express?o de prote?nas e na coloniza??o de G. diazotrophicus estirpe PAL5 em plantas de arroz. Para tal, a estirpe selvagem de G. diazotrophicus foi cultivada em triplicata biol?gica em meio LGI-P modificado, seguido da exposi??o das c?lulas ao tratamento com a presen?a e a aus?ncia de H2O2 (tratamento controle). As c?lulas foram coletadas em diferentes intervalos de tempo ap?s a indu??o ou n?o com o H2O2, foram realizadas coletas de 15, 30 e 60 minutos. A partir destes cultivos foram obtidas as prote?nas totais de cada tratamento as quais foram analisadas por meio de prote?mica quantitativa label-free. Na an?lise de espectrometria de massa foram identificadas prote?nas em v?rios processos celulares como replica??o, transcri??o, divis?o celular, prote?lise, processos biossint?ticos, transporte, entre outros. As prote?nas envolvidas na defesa celular contra o estresse oxidativo foram identificadas ap?s 30 minutos de exposi??o ao H2O2, com aumento da abund?ncia de Peroxidase e Super?xido Dismutase. Al?m dessas prote?nas, v?rias outras prote?nas relacionadas aos processos de oxida??o-redu??o tamb?m foram observadas com maior abund?ncia diferencial. Em adi??o foi realizado um estudo visando verificar se o estresse oxidativo induzido por H2O2 afeta a coloniza??o da estirpe PAL5 quando inoculada em plantas de arroz. Para tal, foi realizado o cultivo das plantas de arroz variedade IAC4440, inoculadas ou n?o com a estirpe PAL5 contendo o gene rep?rter mcherry inserido no plasm?deo pMP7604. As ra?zes foram coletadas e visualizadas em microsc?pio confocal, maceradas e plaqueadas em placas de meio LGI-P modificado para contagem das unidades formadoras de col?nia (UFC). Os resultados obtidos neste ensaio mostram que o estresse oxidativo induzido por H2O2 n?o afetou a coloniza??o desta bact?ria nas plantas de arroz j? que n?o houve diferen?a no n?mero de UFC entre os diferentes tratamentos e a an?lise microsc?pica mostrou que a coloniza??o endof?tica das ra?zes pela estirpe PAL5 n?o foi alterada pelo estresse oxidativo. Os resultados da an?lise prote?mica associada aos estudos de coloniza??o sugerem que a bact?ria PAL5 aciona mecanismos de prote??o ao estresse oxidativo visando diminuir rapidamente os n?veis de esp?cies reativas de oxig?nio para que estes n?o afetem seu desenvolvimento e coloniza??o endof?tica.",
 	publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Fitotecnia},
 	note = {Instituto de Agronomia}
}