@PHDTHESIS{ 2014:1837776795, title = {Estudo de carrapatos associados com aves no entorno do tingu?, Nova Igua?u, Rio de Janeiro, Brasil; detec??o de Rickettsia spp., e o desenvolvimento de m?todos moleculares para an?lise de intera??es carrapato-microrganismo}, year = {2014}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/2969", abstract = "Carrapatos parasitos de aves silvestres podem servir como vetores deagentes patog?nicos de grande import?ncia para a sa?de silvestre e coletiva. Assim, o presente estudo analisou a preval?ncia e intensidade de infesta??o de carrapatos em aves silvestres capturadas em tr?s regi?es de Mata Atl?ntica, com diferentes n?veis de antropiza??o, situada em Nova Igua?u, estado do Rio de Janeiro, Brasil, com o objetivo de avaliar a rela??o entre a preval?ncia de infesta??o e ?reas preservadas na regi?o. As capturas foram realizadas no per?odo de maio de 2011 a abril de 2012 onde foram capturadas 625 aves representadas por 98 esp?cies divididas em 26 fam?lias e sete ordens, totalizando 14,2% da riqueza das esp?cies de aves do estado. O total de 17,44% (n=109; 109/625) das aves capturadas estavam parasitadas por 458 carrapatos, sendo 88,2% (n=404; 404/458) no est?gio de larva (LL) e 11,8% (n=54; 54/458) no est?gio de ninfa. Dentre os ixod?deos coletados, 99% (n=453) eram do g?nero Amblyomma: Amblyomma longirostre (LL= 345; NN= 34), Amblyomma nodosum (NN= 13), Amblyomma calcaratum (NN= 3), Amblyomma varium (NN= 2); Amblyomma coelebs (NN=1), Amblyomma naponense (LL= 1), Amblyomma ovale (LL=1) e Amblyomma sp. (LL= 53). O g?nero Haemaphysalis sp. foi representado por quatro larvas e uma ?nica ninfa, correspondendo a 1% dos carrapatos coletados. Al?m disso, foram relatadas novas esp?cies de aves hospedeiras no Brasil, o caso in?dito de superinfesta??o por A. longirostre em Xiphorhynchus guttatus. An?lises moleculares (sequenciamento do gene mitocondrial 16S DNAr), permitiram a valida??o da identifica??o morfol?gica ao n?vel de esp?cie de larvas de A. longirostre sem a necessidade de aplica??o de m?todos de clarifica??o comumente utilizados. A detec??o e identifica??o de agentes patog?nicos e de seus hospedeiros carrapatos dependem cada vez mais de m?todos moleculares, que tem por princ?pio a extra??o do DNA do carrapato e do microrganismo abrigado por ele. Na tentativa de estandardiza??o da extra??o do DNA de ixod?deos e de sua microbiota associada, o presente estudo comparou seis m?todos de extra??o de DNA (Fervura em ?gua est?ril, InstaGene?, QIAamp? DNA Mini Kit, Fenol:clorof?rmio, Terra de diatom?cea e Hotshot modificado). At? o momento, amostras submetidas ? extra??o com Kit e Fenol:clorof?rmio apresentam melhores resultados (em termos de quantidade e qualidade do DNA extra?do) quando comparado aos outros m?todos. An?lise in silico de sequ?ncias que codificam os genes gltA , htrA e ompB de carrapatos associados ? esp?cies de rickettsias revelaram ser a base para um novo m?todo de PCR-RFLP, que permitiu a identifica??o diferencial de esp?cies de Rickettsia encontradas no Brasil. O m?todo foi avaliado utilizando larvas e ninfas de Amblyomma longirostre, Amblyomma ovale e Amblyomma varium coletadas nas aves capturadas neste estudo. A bact?ria ?Candidatus Rickettsia amblyommii? foi identificada em 100% (17/17) dos A. longirostre examinados, enquanto que as outras duas esp?cies de carrapatos foram universalmente PCR negativas. O m?todo b?sico emprega as endonucleases de restri??o MspI e Rsal e pode ser realizada no decurso de um ?nico dia de trabalho. Este oferece um meio conveniente e rent?vel para executar a an?lise em grande escala de popula??es de carrapatos, e deve ser um benef?cio para os pesquisadores que n?o disp?em de recursos financeiros ou t?cnicos necess?rios para a identifica??o baseada no sequenciamento de nucleot?deos. Em conclus?o, este estudo amplia o conhecimento das rela??es ecol?gicas entre ixod?deos e a avifauna em um importante bioma da regi?o Neotropical, com novas perspectivas no ?mbito das t?cnicas moleculares aplicadas a inqu?ritos de parasitismo que envolve carrapatos parasitos de aves silvestres", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }