@PHDTHESIS{ 2015:576654180,
 	title = {Isolamento e caracteriza??o molecular de duas novas cepas de Anaplasma marginale e estabelecimento de linhagens de c?lulas embrion?rias do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus},
 	year = {2015},
 	url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/2753",
 	abstract = "No primeiro cap?tulo foram isoladas e caracterizadas duas novas cepas de Anaplasma
 marginale oriundas do munic?pio de Serop?dica, RJ, em linhagem de c?lulas de carrapato
 Ixodes scapularis (IDE8), possibilitando novos estudos no diagn?stico com a utiliza??o de
 cepas locais. No segundo cap?tulo foram desenvolvidas e caracterizadas as primeiras
 linhagens de c?lulas embrion?rias de Rhipicephalus (Boophilus) microplus oriundas de cepa
 brasileira. As cepas de A. marginale foram obtidas a partir de sangue de dois bezerros
 naturalmente infectados pertencentes ? Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
 (UFRRJ), Serop?dica. Ap?s isolamento, as cepas foram caracterizadas morfologicamente,
 atrav?s da microscopia de luz e molecularmente atrav?s do semi-nested PCR do gene msp1?.
 Duas cepas de A. marginale foram isoladas e nomeadas como AmRio1 e AmRio2. Pequenas
 col?nias foram observadas em l?minas de citocentr?fuga coradas com Giemsa 1:10, de cada
 isolado, 60 dias ap?s o in?cio da cultura. An?lises de uma repeti??o em tandem de MSP1a da
 cepa AmRio1 resultou em uma nova sequ?ncia (nomeada de 162) com um amino?cido
 diferente. O resultado da an?lise filogen?tica demonstrou que as cepas de A. marginale a
 partir do Brasil e Argentina formam dois grandes clusters. Para o estabelecimento das
 linhagens de R. (B.) microplus, os carrapatos foram provenientes de cepa mantida em bezerros
 no Laborat?rio de Doen?as Parasit?rias, UFRRJ, Serop?dica. No 13? dia de postura, a massa
 de ovos foi esterilizada, macerada, filtrada e centrifugada a 200 xg por 10 minutos. O ?pellet?
 foi suspenso em meio Leibovitz?s L15 e dividido em 6 frascos de 25 cm2, dos quais 3
 contaminaram, um foi depositado no banco de c?lulas do Instituto Pirbright e outros 2 foram
 caracterizados no presente estudo (linhagens BMEBR1 e BMEBR2) atrav?s da an?lise
 molecular do gene 16S DNAr (PCR), curva de crescimento e microscopia de luz e
 epifluoresc?ncia. Com 60 dias de cultivo, as c?lulas passaram a apresentar um aspecto
 confluente, caracterizando a forma??o da monocamada. Existiu uma completa similaridade
 (100%) das novas linhagens BMEBR1 e BMEBR2 com R. (B.) microplus do Brasil
 (EU918178.1), da Costa Rica (EU918179.1), do Paraguai (EU918180.1), entre outros. Ambas
 as cepas apresentaram crescimento menor que a linhagem de R. (B.) microplus BME/CTVM2
 oriunda da Costa Rica. A linhagem BMEBR1 possui maior capacidade fagoc?tica que as
 linhagens BMEBR2 e BME/CTVM2. Al?m disso, essas linhagens possuem caracter?sticas de
 acidifica??o, produ??o de corp?sculo lip?dico e estresse oxidativo diferentes entre si. As
 novas linhagens foram congeladas e descongeladas com sucesso e apresentaram-se est?veis
 com rela??o ?s caracter?sticas morfol?gicas e de taxa crescimento. Desta forma, estas
 linhagens podem ser utilizadas em futuros estudos na propaga??o das novas cepas de A.
 marginale isoladas.",
 	publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias},
 	note = {Instituto de Veterin?ria}
}