@PHDTHESIS{ 2009:1207765810, title = {Lignifica??o comparativa de Eucalyptus urophylla S. T. Blake por ferramentas biotecnol?gicas e polimeriza??o in vitro}, year = {2009}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/2025", abstract = "Apesar dos avan?os tecnol?gicos, a compreens?o da forma??o estrutural da lignina ainda ? alvo de in?meras investiga??es cient?ficas. Esta pesquisa foi realizada com calos de Eucalyptus urophylla S.T. Blake para a produ??o de lignina. Os calos foram obtidos a partir de explantes de segmentos caulinares desenvolvidos em meios de cultura acrescidos de uma combina??o da citocinina TDZ e das auxinas ?cidos: 3-indolac?tico (AIA), ?-naftalenoac?tico (ANA) e diclorofenoxiac?tico (2,4-D), nas formas isoladas e conjugadas. Para a produ??o de c?lulas em suspens?o foram utilizados os calos formados no tratamento contendo 20?M de AIA + 3?M de TDZ, ap?s 30 dias de cultivo in vitro. Obtidas as c?lulas em suspens?o, a produ??o de lignina foi induzida empregando-se quatro elicitores: ?cido jasm?nico (AJ), ANA, sacarose e testemunha (sem o emprego de elicitores). O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, 4 repeti??es e um Erlenmeyer contendo 125 ml de cultura de c?lulas em suspens?o. O teste de Wiesner confirmou a presen?a de lignina, em todos os tratamentos testados. Em 3 das 4 repeti??es foram realizados subtratamentos para a produ??o de DHPs (pol?meros por desidrogena??o oxidativa) a partir do filtrado da suspens?o com H2O2, H2O2 + peroxidase e peroxidase. A an?lise desses subtratamentos foi realizada pela detec??o da produ??o de polilign?is atrav?s de raios infravermelho (IV) e resson?ncia magn?tica nuclear do hidrog?nio (RMN H). O filtrado da suspens?o da repeti??o 4 foi analisado por ultravioleta (UV), IV, RMN 13C e RMN H, sendo constatada a presen?a de lignina extracelular, com o maior teor sendo observado na presen?a do elicitor sacarose, seguido do ANA e AJ. As c?lulas em suspens?o apresentaram aumento no teor de lignina na parede celular em todos os tratamentos em rela??o ? testemunha e os maiores valores foram com o meio contendo sacarose. Foram analisadas tamb?m as DHPs tendo como colch?o o meio de cultura MS acrescido dos mesmos elicitores testados na fase de suspens?o celular. Para isto foram utilizados como precursores os ?lcoois conifer?lico ou sinap?lico, H2O2 e peroxidase, com a lignina analisada em RMN H e RMN 13C. Os resultados mostraram que houve s?ntese de DHPs do ?lcool conifer?lico (DHP1c, DHP2c e DHP4c) e do ?lcool sinap?lico (DHP2s). Porem quando se utilizou como precursor o ?lcool conifer?lico n?o foram sintetizadas DHPs no tratamento contendo sacarose como elicitor. E, quando foi utilizado como precursor o ?lcool sinap?lico, somente foram formadas DHPs na presen?a do elicitor ANA. Concluiu-se, ent?o, que a sacarose apresentou-se como um elicitor adequado para a produ??o de lignina nas c?lulas em suspens?o, tanto em n?vel celular quanto extracelular. Entretanto, isto n?o foi observado em rela??o ? produ??o de DHP. A auxina ANA teve funcionalidade maior na forma??o de DHP2c e DHP2s. Estes resultados devem ser considerados como um avan?o nos estudos de lignifica??o com a utiliza??o de c?lulas em suspens?o de E. urophylla. Quando esses questionamentos forem identificados e solucionados ser? poss?vel o desenvolvimento de novos indiv?duos desta esp?cie que conduzam ? produ??o de produtos florestais de melhor qualidade, com menor impacto ambiental nos processos industriais.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Ambientais e Florestais}, note = {Instituto de Florestas} }