@MASTERSTHESIS{ 2010:1850517265,
 	title = {Cultivo de Borrelia burgdorferi (Spirochaetales: Spirochaetaceae) em c?lulas embrion?rias de Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae).},
 	year = {2010},
 	url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/1896",
 	abstract = "As culturas celulares oferecem um simplificado sistema de observa??o que pode ser
 particularmente ?til para estudos de microrganismos intracelulares e epicelulares. O objetivo
 deste estudo foi estabelecer cultura prim?ria in vitro de c?lulas embrion?rias do carrapato
 Rhipicephalus sanguineus para cultivo da espiroqueta Borrelia burgdorferi, cepa americana
 G39/40. A cultura foi estabelecida a partir de ovos embrionados de f?meas ingurgitadas de R.
 sanguineus com 12 dias ap?s o ?nicio da postura, utilizando o meio de cultivo Leibovitz?s L-
 15B, suplementado com 20% de soro fetal bovino inativado, 10% de caldo triptose fosfato,
 0,1% fra??o V de albumina bovina, 1% de glutamina e 0,1% de antibi?tico gentamicina, pH
 6,8. Com a forma??o de uma monocamada celular, o meio de cultura inicial L-15B foi
 retirado dos tubos e trocado por meio Barbour-Stoenner-Kelly (BSK) ou BSK com L-15B
 sem antibi?tico. As espiroquetas previamente cultivadas em BSK foram contadas e inoculadas
 nos tubos, apresentando concentra??o final de aproximadamente 6,2 x 105 espiroquetas/mL. A
 contagem de B. burgdorferi dos tubos inoculados foi realizada quando o meio apresentou
 colora??o amarela, indicativa de elevada acidez devido ? multiplica??o das espiroquetas. No
 terceiro dia ap?s o in?cio da cultura prim?ria de c?lulas embrion?rias de R. sanguineus, foi
 poss?vel observar a fixa??o de agregados celulares na superf?cie dos frascos. A partir destes
 agregados, surgiram diversos tipos celulares, como grandes c?lulas fibroblast?ides e
 estruturas semelhantes a ves?culas e tubos. Na segunda semana, foi observado o aparecimento
 das c?lulas epiteli?ides ou redondas e, com 21 dias de cultivo, visualizou-se a forma??o de
 uma monocamada celular devido ao aspecto confluente das c?lulas. O meio de cultivo L-15B
 demonstrou ser eficiente para o desenvolvimento da cultura prim?ria de c?lulas embrion?rias
 de R. sanguineus. Houve grande multiplica??o das espiroquetas cultivadas com c?lulas
 embrion?rias quando comparada ? concentra??o inicial, assim como das espiroquetas
 cultivadas na aus?ncia das c?lulas de carrapato, observando-se um aumento em 100 vezes do
 n?mero de B. burgdorferi. Sete dias ap?s a inocula??o, foram recuperadas maiores
 concentra??es de B. burgdorferi nos tubos onde se utilizou somente o meio BSK, do que nos
 tubos onde foi utilizado BSK juntamente com Leibovitz?s L-15B. Independente dos meios de
 cultivo testados, a concentra??o final de B. burgdorferi dos tubos com c?lulas embrion?rias de
 carrapato foi menor do que a dos tubos sem c?lulas embrion?rias. Na observa??o dos tubos de
 cultivo ? microscopia de contraste de fase, as espiroquetas apresentaram-se aderidas ?s c?lulas
 de carrapato epiteli?ides e fibroblast?ides de maneira epicelular e com grande motilidade. As
 c?lulas embrion?rias de R. sanguineus cultivadas em meio BSK, com ou sem in?culo de B.
 burgdorferi, pararam sua multiplica??o, apresentaram degenera??o na membrana e muitas
 desprenderam-se da superf?cie do frasco. As c?lulas cultivadas em meio BSK e L-15B
 continuaram a se multiplicar, muitas ainda estavam ?ntegras e aderidas ao frasco, com
 presen?a de tecidos em desenvolvimento, com menos c?lulas degeneradas e flutuantes que as
 cultivadas somente em BSK. A espiroqueta B. burgdorferi, cepa G39/40, aderiu, cresceu,
 multiplicou e apresentou grande motilidade nos cultivos com c?lulas embrion?rias do
 carrapato R. sanguineus, utilizando meios BSK e Leibovitz?s L-15B.",
 	publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Medicina Veterin?ria (Patologia e Ci?ncias Cl?nicas)},
 	note = {Instituto de Veterin?ria}
}