@MASTERSTHESIS{ 2015:385079814, title = {Estudos experimentais de Plasmodium juxtanucleare Versiani e Gomes, 1941 em Gallus gallus utilizando as t?cnicas microsc?picas e moleculares com ?nfase na padroniza??o de PCR em tempo real para o diagn?stico}, year = {2015}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/1830", abstract = "Este estudo teve como objetivo desenvolver um ensaio de PCR em tempo real (qPCR) para o diagn?stico de Plasmodium spp. utilizando os genes 18S rDNA e cyt b. Foram coletadas 101 amostras de sangue de aves da esp?cie Gallus gallus de cria??o r?stica ou org?nica no munic?pio de Serop?dica, Rio de Janeiro. Os sangues coletados foram utilizados na prepara??o de esfrega?os de sangue e para extra??o do ?cido desoxirribonucl?ico (DNA) destas amostras. Protocolos de ensaios moleculares foram testados, tal como o PCR convencional (cPCR), nestedPCR (nPCR) e qPCR para Plasmodium spp. Neste estudo dois protocolos de qPCR foram desenvolvidos utilizando oligoiniciadores desenhados com alvo no citocromo b e 18S rDNA. O limite de detec??o para os dois genes qPCR foi de 10 c?pias do alvo de DNA, que foram maiores do que o limite de detec??o observado em nPCR e cPCR. Em qPCR, 69,30% (n = 70/101) amostras foram positivas com alvo no gene 18SrDNA e 59,40%(n = 60/101) amostras positivas com alvo no gene cyt b. Em nPCR e cPCR, 54,45% (n = 55/101) e 52,47% (n = 53/101) amostras foram positivas, respectivamente. Em microscopia de esfrega?o de sangue, 31 (30,69%) amostras foram positivas. N?o houve discord?ncia entre os resultados (p> 0,05) de qPCR para os genes 18SrDNA e cyt b.. Al?m disso, qPCR foi mais sens?vel do que as outras t?cnicas discutidas, principalmente relacionado com a microscopia ?ptica (p <0,05). Portanto, os dois ensaios de qPCR desenvolvidos neste estudo mostraram mais sensibilidade do que outras t?cnicas e permitiu a detec??o de Plasmodium spp. em aves de cria??o r?stica mesmo com baixa parasitemia.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias Veterin?rias}, note = {Instituto de Veterin?ria} }