@PHDTHESIS{ 2012:1299458586, title = {An?lise prote?mica de estirpes selvagem PAL5T e mutante lao- de Gluconacetobacter diazotrophicus na presen?a e aus?ncia de triptofano e o efeito de sua inocula??o em plantas micropropagadas de cana-de-a??car}, year = {2012}, url = "https://tede.ufrrj.br/jspui/handle/jspui/1557", abstract = "Este estudo teve por objetivo avaliar o perfil de express?o de prote?nas de G. diazotrophicus PAL5 e seu mutante defectivo na produ??o de compostos ind?licos (lao-) cultivados na presen?a e aus?ncia de triptofano atrav?s da t?cnica de 2DE-PAGE. A an?lise por espectrometria de massa permitiu a identifica??o de 24 prote?nas diferencialmente expressas. A maioria das prote?nas com a express?o diminu?da em PAL5 cultivada em meio com triptofano em rela??o ao meio de cultivo sem esse amino?cido pertenceu ? categoria modifica??o p?s-traducional, turnover de prote?nas e chaperonas. No mutante lao- cultivado nas mesmas condi??es, a maioria das prote?nas que apresentaram express?o diferencial pertencia ? categoria produ??o e convers?o de energia. Em adi??o, a maioria das prote?nas que foram diferencialmente expressas no mutante lao- em compara??o com a estirpe selvagem PAL5 pertencia ? categoria metabolismo e transporte de carboidratos. Por outro lado, n?o foram observadas prote?nas relacionadas ? bioss?ntese de triptofano em nenhuma condi??o analisada possivelmente devido ao baixo rendimento das identifica??es por espectrometria. Al?m das an?lises dos perfis de prote?nas, os mutantes lao- e nif- de G. diazotrophicus foram inoculados em plantas de cana-de-a??car micropropagadas com o objetivo de determinar a influ?ncia das auxinas na promo??o do crescimento dessa cultura em compara??o com a estirpe selvagem PAL5. O primeiro experimento, conduzido em condi??es de hidroponia pelo per?odo de 10 dias, mostrou efeito significativo da inocula??o da estirpe selvagem na promo??o de crescimento da parte ?rea das plantas, enquanto que o mutante lao-, n?o diferiu estatisticamente do controle n?o inoculado. O outro experimento, foi conduzido por 120 dias em vasos com substrato areia:vermiculita contendo 30 ou 60 ppm de sulfato de am?nio enriquecido com 15N e as pl?ntulas foram inoculadas in vitro. Os resultados mostraram uma diferen?a visual nas ra?zes das plantas inoculadas com PAL5, que se mostraram mais volumosas, aparentando um n?mero mais elevado de ra?zes secund?rias e p?los radiculares. J? as plantas inoculadas com lao- apresentaram ra?zes mais grossas, com um n?mero muito reduzido de ramifica??es ou p?los radiculares. A biomassa seca da parte a?rea das plantas inoculadas com PAL5 foi superior ?quelas inoculadas com as estirpes mutantes para as duas doses de nitrog?nio, por?m essa diferen?a n?o foi significativa. N?o foram observadas evid?ncias de contribui??o da FBN, por?m as plantas inoculadas com PAL5 foram menos eficientes na recupera??o do N fertilizante. Em conclus?o, o presente estudo mostra a ocorr?ncia de diversas prote?nas diferencialmente expressas tanto na estirpe selvagem como em lao- quando crescidas na presen?a e aus?ncia do amino?cido triptofano. A defini??o do papel dessas prote?nas no metabolismo da bact?ria requer estudos adicionais, inclusive em diferentes condi??es de cultivo. Em adi??o, a inocula??o dessas bact?rias em plantas de cana-de-a??car mostrou o efeito hormonal da bact?ria no desenvolvimento das ra?zes e, por conseguinte na maior efici?ncia de uso do N aplicado. Entretanto, dado a limita??o de espa?o f?sico dos vasos para o desenvolvimento das plantas, sugere-se a realiza??o de novos experimentos, em condi??es mais apropriadas, para confirmar a influ?ncia da produ??o de ?ndoles e da FBN durante a associa??o da bact?ria com as plantas de cana-de-a??car.", publisher = {Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Fitotecnia}, note = {Instituto de Agronomia} }